articol de cercetare

Vizualizati profilul ORCIDTautaut Deviese, Ivor Karavanic, Daniel Comeskey, Cara Kubiak, Petra Korlevic, Mateja Hajdinjak, Sinisa Radovic, Noemi Procopio, Michael Buckley, Svante Paabo si Tom Higham

  1. Editat de Richard G. Klein, Universitatea Stanford, Stanford, CA si aprobat 28 iulie 2017 (primit pentru revizuire 5 iunie 2017)

Semnificatie

Datarea cu radiocarbon a resturilor de Neanderthal recuperate din Pestera Vindija (Croatia) a dezvaluit initial rezultate surprinzator de recente: 28.000–29.000 BP Acest lucru a presupus ca ramasitele ar putea reprezenta o populatie neanderthala de refugiu care supravietuieste tarziu si a sugerat ca ar fi putut fi responsabili pentru producerea unei parti superioare timpurii. Artefacte paleolitice produse mai frecvent de oameni moderni anatomic. Acest articol prezinta datele de radiocarbon revizuite ale oaselor umane de pe acest site obtinute folosind o metoda de purificare mai robusta care vizeaza aminoacidul hidroxiprolina. Datele arata ca toate ramasitele de Neanderthal provin dintr-o perioada mult mai anterioara (> 40.000 cal BP). Aceste date revizuite schimba interpretarea noastra a acestui sit important si demonstreaza ca neanderthalii Vindija probabil nu s-au suprapus temporal cu oamenii moderni timpurii.

Abstract

Datarile anterioare ale Vi-207 si Vi-208 Ramasite de neanderthal din Pestera Vindija (Croatia) au dus la sugestia ca neanderthalii au supravietuit acolo, pana la 28.000 – 29.000 BP. Datarile ulterioare au dat date mai vechi, interpretate ca varste de cel putin ∼32.500 BP. au redirectionat aceste aceleasi exemplare folosind o abordare bazata pe extractia hidroxiprolinei aminoacizi, folosind cromatografie lichida preparativa de inalta performanta (Prep-HPLC). Aceasta metoda este mai eficienta in eliminarea contaminarii moderne in colagenul osos. Datele revizuite sunt mai vechi de 40.000 BP, ceea ce sugereaza ca neanderthalii Vindija nu au trait mai recent decat altii in Europa si, probabil, preceda venirea oamenilor anatomic moderni in Europa de Est. Am aplicat zooarheologia prin spectrometrie de masa (ZooMS) pentru a gasi resturi suplimentare de hominina. Am identificat un os care este Neanderthal, pe baza ADN-ului sau mitocondrial, si datat direct la 46.200 ± 1.500 BP. De asemenea, am incercat sa datam sase puncte ale osului paleolitic superior timpuriu din unitatile stratigrafice G1, Fd / d + G1 si Fd / d, Fd . Un artefact osos a dat o data de 29.500 ± 400 BP, in timp ce restul nu a dat colagen. In plus, am dat din probe de oase de la unitatile G1 si G1 – G3. Aceste date sugereaza o coincidenta a artefactelor osoase timpurii ale paleoliticului superior timpuriu, in special punctele pe baza de impartire, alaturi de resturile de neanderthalieni este un rezultat al amestecarii postdepozitive, mai degraba decat o asociere intre cele doua grupuri, desi este necesara mai multa munca pentru a arata acest lucru definitiv . De asemenea, am incercat sa datam sase puncte osoase timpurii ale paleoliticului superior din unitatile stratigrafice G1, Fd / d + G1 si Fd / d, Fd. Un artefact osos a dat o data de 29.500 ± 400 BP, in timp ce restul nu a dat colagen. In plus, am dat din probe de oase de la unitatile G1 si G1 – G3. Aceste date sugereaza o coincidenta a artefactelor osoase timpurii ale paleoliticului superior timpuriu, in special punctele pe baza de impartire, alaturi de resturile de neanderthalieni este un rezultat al amestecarii postdepozitive, mai degraba decat o asociere intre cele doua grupuri, desi este necesara mai multa munca pentru a arata acest lucru definitiv . De asemenea, am incercat sa datam sase puncte osoase timpurii ale paleoliticului superior din unitatile stratigrafice G1, Fd / d + G1 si Fd / d, Fd. Un artefact osos a dat o data de 29.500 ± 400 BP, in timp ce restul nu a dat colagen. In plus, am dat probe de oase de animale de la unitatile G1 si G1 – G3. Aceste date sugereaza o coincidenta a artefactelor osoase timpurii ale paleoliticului superior timpuriu, in special punctele pe baza de impartire, alaturi de resturile de neanderthalieni este un rezultat al amestecarii postdepozitive, mai degraba decat o asociere intre cele doua grupuri, desi este necesara mai multa munca pentru a arata acest lucru definitiv .

  • Pestera Vindija (Croatia)
  • intalnire AMS cu un singur compus
  • Analiza ADN
  • zooarheologie prin spectrometrie de masa
  • Tranzitia paleolitica mijlocie la superioara

Perioada cuprinsa intre 45.000 si 35.000 cal BP in Europa a fost martorul asa-numitei tranzitii bioculturale de la Paleoliticul Superior de Mijloc la cel timpuriu superior, cand oamenii umani anatomic moderni au deplasat grupuri neandertale pe continent (1, 2). Raman inca intrebari semnificative cu privire la natura precisa a acestei tranzitii, oamenii responsabili pentru diferitele industrii tranzitorii timpurii ale paleoliticului superior, gradul de suprapunere intre neandertali si oamenii moderni si momentul disparitiei primului. Recordul european pentru tranzitie isi pastreaza interesul, deoarece este cea mai bine documentata secventa pentru disparitia unui grup hominin disponibil (3). Cele mai recente date, atat radiometrice cat si genetice, sugereaza neandertalienii si oamenii moderni au coexistat sau s-au suprapus pana la cateva mii de ani in Europa pana la disparitia neanderthalilor la aproximativ 40.000 cal BP (4, 5). Determinarea atributelor spatiale ale populatiei umane neandertale si moderne din Europa este o zona de cercetare activa, iar o cronologie fiabila ramane esentiala.

Intelegerea noastra a proceselor bioculturale implicate in tranzitie a fost influentata foarte mult de metodele de datare imbunatatite ale spectrometriei de masa acceleratoare (AMS) si de aplicarea acestora la datarea directa a ramasitelor neandertalilor tarzii si a oamenilor moderni timpurii, precum si de artefacte recuperate de pe site-urile pe care le-au ocupat. . A devenit clar ca au existat probleme majore in ceea ce priveste fiabilitatea si acuratetea datarii in general, in general, cu paleolitic, studiile subliniind probleme cu subestimarea varstelor diferitelor esantioane datate de pe site-urile analizate anterior (6). Am lucrat la redirectionarea unor presupuse situri de neanderthal cu supravietuire tarzie din intreaga Europa, care au inclus resturi umane si arheologice de pe situri precum Mezmaiskaya (Rusia), in cazul in care un copil neanderthal anterior datat direct a dat o varsta radiocarbona de ∼29.000 BP (7) si Zafarraya (Spania), despre care se crede ca ar contine resturi de neandertal care se aglomereaza la varsta in jurul unui grup mic de oase de animale din seria U, intre 33.400 si 28.900 BP (8). La Mezmaiskaya, datele AMS obtinute pentru Neanderthal excavate deasupra individului datat anterior au fost substantial mai vechi (9). Acest lucru, impreuna cu alte date AMS din fauna marcata din aceleasi orizonturi arheologice, au sugerat ca data initiala de 29.000 BP nu ar putea fi corecta. La Zafarraya, Wood si colab. (10) au aratat ca, atunci cand au fost redirectionate folosind metode de ultrafiltrare, oasele care au produs varste de ∼33.000 BP erau, de fapt, peste limita radiocarbonului, ceea ce sugereaza ca ramasitele neandertale nu sunt probabil atat de tinere cum se credea anterior. In ambele cazuri,

Resturile fosile neandertale de la nivelul G1 al pesterii Vindija din nordul Croatiei au ramas in literatura de specialitate ca persoane potential tarzie. Avand in vedere dovezile din specimenul Pestera cu Oase, care demonstreaza o descendenta recenta a neanderthalului intr-un om modern de 40.000 cal BP din coridorul Dunarii (5), datarea reinnoita a ramasitelor Vindija a trecut.

Doua exemplare, Vi-207 si Vi-208, au fost initial direct AMS datate la sfarsitul anilor 1990 la unitatea de accelerare a radiocarburilor din Oxford (ORAU). Vi-207 este o mandibula posterioara dreapta, iar Vi-208 este un fragment parietal, ambele prezentand morfologie specifica neandertalului (11, 12). Rezultatele initiale ale radiocarbonului au fost 29.080 ± 400 BP (OxA-8296) si 28.020 ± 360 BP (OxA-8295) (13). Higham si colab. (14) a incercat sa redate aceste exemplare luand cantitati foarte mici de colagen ramase din pre-tratarea esantionului initial si ultrafilterand produsul inainte de intalnirea cu AMS. Masuratorile revizuite au fost 32.400 ± 1.800 BP (Vi-207: OxA-X-2089-07) si 32.400 ± 800 BP (Vi-208: OxA-X-2089-06), ceea ce a indicat ca datele anterioare erau intr-adevar prea tinere. Pentru proba Vi-208, dupa ultrafiltrare, raportul atomic C / N a fost de 3,4, ceea ce indica colagen de calitate acceptabila. Cu toate acestea, pentru Vi-207, fractia> 30-kDa obtinuta a produs un raport C / N de 4,3, ceea ce indica prezenta unui contaminant cu greutate moleculara mare. Data radiocarbonului pentru acest esantion ar putea include, prin urmare, o contaminare necolagena cu greutate moleculara mai mare, posibil reticulata cu colagenul. Pe baza potentialelor probleme asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminanti ramasi, OxA-X-2089-06 a fost considerat a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Fractia obtinuta de 30 kDa a produs un raport C / N de 4,3, ceea ce indica prezenta unui contaminant cu greutate moleculara mare. Data radiocarbonului pentru acest esantion ar putea include, prin urmare, o contaminare necolagena cu greutate moleculara mai mare, posibil reticulata cu colagenul. Pe baza problemelor potentiale asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminare ramasa, OxA-X-2089-06 a fost considerata a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Fractia obtinuta de 30 kDa a produs un raport C / N de 4,3, ceea ce indica prezenta unui contaminant cu greutate moleculara mare. Data radiocarbonului pentru acest esantion ar putea include, prin urmare, o contaminare necolagena cu greutate moleculara mai mare, posibil reticulata cu colagenul. Pe baza potentialelor probleme asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminanti ramasi, OxA-X-2089-06 a fost considerat a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Data radiocarbonului pentru acest esantion ar putea include, prin urmare, o contaminare necolagena cu greutate moleculara mai mare, posibil reticulata cu colagenul. Pe baza potentialelor probleme asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminanti ramasi, OxA-X-2089-06 a fost considerat a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Data radiocarbonului pentru acest esantion ar putea include, prin urmare, o contaminare necolagena cu greutate moleculara mai mare, posibil reticulata cu colagenul. Pe baza problemelor potentiale asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminare ramasa, OxA-X-2089-06 a fost considerata a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Pe baza potentialelor probleme asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminanti ramasi, OxA-X-2089-06 a fost considerat a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4). Pe baza problemelor potentiale asociate cu dimensiunile reduse ale esantioanelor redate si a potentialului de contaminare ramasa, OxA-X-2089-06 a fost considerata a fi o varsta minima (14). Daca datele sunt chiar corecte, insa, acestea sunt cele mai recente neanderthaliene cunoscute. Aceasta ar presupune o suprapunere temporala mai extinsa intre neanderthalieni si oamenii moderni timpurii din Europa Centrala decat s-a documentat recent (4).

In afara de ramasitele neandertale, nivelul G1 a dat un mic ansamblu arheologic care contine artefacte litice paleolitice mijlocii si superioare, plus cateva puncte osemice ale Paleoliticului superior timpuriu (12). S-a sustinut ca amestecul de neandertali, instrumente ale paleoliticului mijlociu si tehnologia paleoliticului superior a fost rezultatul crioturbarii si al Ursus spelaeusactivitate la nivelul G1, cu elemente care se amesteca la nivelul G1 atat de la unitatea de paleolitic superior F deasupra, cat si de la nivelul paleoliticului mediu G3 de mai jos (15, 16). Zilhao (17) a sugerat ca ansamblul litic G1 are paralele cu tehnocomplexul szeletian si, in plus, ca exista un amestec de elemente ale Szeletianului si Aurignacianului I si II la nivel [a se vedea si Svoboda (18)]. Karavanic si Smith (19) au sugerat ca amestecul de elemente poate reprezenta interactiunea si posibila aculturatie intre oamenii moderni si neandertalii tarzii. Aceste alternative sunt testabile prin selectarea punctelor osoase umane si organice, precum si a oaselor animalelor, pentru intalnirea AMS reinnoita. Aceasta este ceea ce am intreprins si descrie aici.

materiale

Un total de 10 probe din Pestera Vindija au fost selectate pentru datarea radiocarbonului AMS (tabelul 1). Acestea au inclus trei exemplare neandertale datate anterior (Vi-207, Vi-208 si Vi-33.19), precum si un al patrulea os de neanderthal (Vi- * 28) descoperit folosind zooarheologia prin screeningul prin spectrometrie de masa (ZooMS). In plus, pentru a testa realitatea co-aparitiei artefactelor anterioare si ale punctului antler paleolitic superior cu resturile de neanderthal, am selectat sase puncte osemice pentru datare ( Anexa SI, Fig. S1). Pentru testarea conservarii colagenului, am luat pulbere osoasa de ∼3–5 mg, folosind exercitii de carbura de tungsten si am masurat continutul de% N. Acesta este un indicator al conservarii colagenului (20). Rezultatele arata ca un singur esantion de punct osos (Vi-3446) a avut suficiente niveluri de azot pentru a justifica prelevarea completa pentru extractia de colagen si datarea AMS; restul au esuat si, prin urmare, nu au fost prelevate mai departe ( apendicele SI , tabelul S1). Am inclus, de asemenea, esantionul dintr-un punct osos pe baza de divizare (Vi-3437) care a fost analizat anterior in laborator, producand doar un randament mic de colagen. Am decis sa incercam sa-l redam, folosind o masa de pornire mai mare de pulbere osoasa. Din pacate, nu a existat suficient colagen din acest esantion dupa pretratare. De asemenea, am selectat patru oase animale de Cervidae(Vi- * 17), Panthera sp. (Vi- * 6), Ursus sp. (Vi- * 7) si Bovidae (Vi- * 60), identificate de ZooMS din unitatile stratigrafice G1 si G1 – G3 pentru a explora problema potentiala a amestecarii postdepozitive in depozite.

Tabelul 1.

Probele selectate pentru intalnirea AMS

Rezultate si discutii

Amprenta de colagen ZooMS.

Am folosit ZooMS pentru a identifica fragmentele de os potential de hominina printre resturile faunale neidentificate de la nivelurile G1 si G3, precum si unitatea stratigrafica G1 – G3. Majoritatea celor 383 de probe analizate au dus la o conservare slaba a colagenului, ceea ce a impiedicat orice identificare la gen sau taxon. Doar 101 probe au produs spectre identificabile; un rezumat al tuturor taxonilor identificati de ZooMS este prezentat in Anexa SI , Tabelul S2. Acest ansamblu este dominat de Ursus si doar sase dintre cele 27 de taxone identificate prin studiul morfologic al oaselor din Miracle si colab. (21) ar putea fi identificate aici. Am identificat un singur specimen de hominina (Fig. 1 A si B), care evidentiaza din nou utilizarea aplicarii unor astfel de tehnici pe grupuri de probe osoase neidentificate ale paleoliticului. Osul a fost analizat folosind tehnici ADN antice pentru a permite identificarea formala a speciilor.

Fig. 1.

( A ) Fotografii de inalta rezolutie ale osului de neanderthal Vi- * 28 gasite folosind ZooMS. Osul face dovada unei taieri probabile si a unor marcaje (partea superioara dreapta a osului). Imaginea a fost facuta dupa ce osul a fost prelevat pentru recurgerea la ZooMS si inainte de esantionarea pentru ADN-ului, radiocarbonului si analizei izotopilor stabile. ( B ) Spectrul de masa MALDI-TOF al colagenului digerat din osul Vi- * 28. Toate varfurile marcate (A, B, C, D si F) indica peptide potrivite de secventa observate in colagenul uman (27, 28).

Analiza ADN a oaselor umane.

Analiza genomica bazata pe ADN-ul mitocondrial a relevat ca toate cele patru exemplare umane se incadreaza in variatia mitocondriala a neandertalului. Genomii mitocondriali complet ai Vi-207 si Vi- * 28 au fost reconstruiti cu o acoperire medie de 103 ori, respectiv 257 de ori. Secventa mitocondriala a ADN-ului Vi-207 a fost identica cu Vi-33.25 si genomul mitocondrial Feldhofer 1, in timp ce Vi- * 28 a avut o secventa mitocondriala identica cu Vi-33.17 ( Anexa SI, Fig. S2). Atat Vi-33.25 cat si Vi-33.17 au fost gasite in stratul I al Pesterii Vindija. Asa cum a fost publicat anterior, Vi-33.19 are aceeasi secventa mitocondriala ca Vi-33.16 (22). Din cauza continutului de ADN endogen mai mic in Vi-208, un genom mitocondrial complet nu a putut fi reconstruit pentru esantion. Cu toate acestea, din cantitatile limitate de secvente mitocondriale, am fost in masura sa urmarim majoritatea variantelor observate la variatii gasite in genomele mitocondriale neandertale secventate anterior ( apendicele SI , fig. S3).

AMS Dating.

Noua dintre esantioanele selectate au produs suficient colagen (sau hidroxiprolina) pentru a fi datate de AMS. Toate datele obtinute pe cele patru exemplare de neandertal la ORAU sunt raportate in tabelul 2. Enumeram, de asemenea, datele obtinute pe alte doua probe de hominina: Vi-75-G3 / h-203, analizate la Laboratorul Radiocarbonului Uppsala (Suedia) (23) ), si Vi-2291-18 (nivel G, sub-strat necunoscut), pregatite la Max Planck Institute, Leipzig si datate la ORAU (24). Diferitele tratamente preliminare ale esantionului sunt, de asemenea, indicate in tabelul 2.

Masa 2.

Radiocarbon dateaza neanderthal Vindija

Vi-208 si Vi-207 au produs date de hidroxiprolina de 42.700 ± 1.600 si respectiv 43.900 ± 2.000 BP. Aceste varste sunt semnificativ mai vechi decat oricare dintre datele obtinute anterior pentru aceste epruvete folosind procedurile AG (colagen gelatinizat filtrat) si AF (colagen ultrafiltrat), iar acest lucru sugereaza cu tarie ca contaminantii cu greutate moleculara mare necolagena, probabil reticulate cu colagenul, erau inca prezent in esantionul datat anterior. Abia prin hidrolizarea colagenului si selectarea hidroxiprolinei am putut elimina cu succes acesti contaminanti.

Masurarea AMS a celui de-al treilea os uman de la nivelul G1 (Vi- * 28), identificata folosind metoda ZooMS, a dat o data de 46.200 ± 1.500 BP Pentru aceste trei HYP (extractia hidroxiprolinei din colagenul osos hidrolizat) date obtinute pe Neanderthal oase de la nivelul G1, am efectuat un test χ2 folosind fractia moderna F14C si eroarea acesteia. Media ponderata de eroare este 0,0038 ± 0,0005 cu o valoare t de 2,57. Daca teste <5.99, valoarea pentru χ2, media ponderata de eroare nu este semnificativa. Acest lucru arata ca rezultatele obtinute pe cele trei oase de neanderthal de la nivelul G1 sunt de acord statistic. Vi-33.19 (nivelul G3) a fost datat, de asemenea, folosind metoda hidroxiprolina si a produs o data de 44.300 ± 1.200 BP, care este o data mai precisa decat cea obtinuta folosind procedura AF (45.300 ± 2.300 BP). Determinarea AF a avut un curent tinta scazut in AMS (85% din curent normal) si a fost imprecisa din acest motiv. Faptul ca cele doua date se suprapun sugereaza o contaminare semnificativa in acest os. Luate impreuna, aceste date arata o ocupatie semnificativ mai veche a site-ului de catre Neanderthals, ceea ce sugereaza ca situl nu poate fi considerat a fi un refugiu pentru neandertalii cu supravietuire tarzie (Fig. 2, cod in apendicele SI). Celelalte doua date obtinute pe esantioanele Vi-33.26 si Vi-75, chiar daca sunt obtinute cu o metoda care poate fi mai putin eficienta in eliminarea contaminarii, confirma ca datarea nivelului G este mai mare de 42.000 BP

Fig. 2.

Model de varsta bayesiana care arata varstele calibrate HYP din cele patru probe de neandertal din Pestera Vindija Modelul este un model de faza simpla in OxCal 4.3 (47), in care se presupune ca toate determinarile F14C nu au nicio ordine relativa. „Start” si „End” corespund limitelor calculate de model. Curba de calibrare a lui Reimer si colab. (48) a fost utilizat pentru a calibra rezultatele. Detalii pot fi gasite in Anexa SI .

Doar un punct osos (Vi-3446 – P41417) a produs suficient azot in timpul recetarii pentru a justifica chimia de pretratare.

porno bbw http://aprilcrocker.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/
porno cu rusoaice mature http://schoolunlock.info/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/
tina kay porno http://dealsense.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/
girl porno http://oxgen.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/amatori
legjobb porno http://pugsupplies.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/anal
porno italian mom http://u-paid.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/asiatice
porno cu fete http://lockandvault.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/beeg
porno cu copi http://everafterville.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/blonde
filme porno cu femei cu pula http://myhubbscoop.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/brazzers
porno film gratis http://pokedev.org/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/brunete
tinere porno http://hkdiscuss.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/filme-porno/chaturbate
soy luna porno http://avndirectory.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/asistenta-medicala-isi-violeaza-pacientul-apoi-ii-face-sex-oral
filme porno gratis 2019 http://www.bowwowcards.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/cuplu-de-tineri-infierbantati-face-sex-in-bucatarie-in-pozitii-ciudate
film porno cu mama http://bitsofagreement.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/tanara-e-fututa-anal-chiar-de-tatal-ei-vitreg-cand-au-ramas-singuri-acasa
porno son http://coramdeobook.net/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/cuplu-de-amatori-au-orgasm-in-timp-ce-fac-sex-ca-animalele
porno cunilingus http://anesthesiahistorymuseum.org/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/creola-super-buna-e-fututa-pe-la-spate-de-un-salbatic-tatuat
porno prostituate http://pcmconnect.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/orgasm-extrem-cu-o-bruneta-fututa-pe-scaun-de-fratele-ei
aurelia tudorache porno http://sparqminicamps.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/doua-scolarite-infierbantate-fac-sex-in-clasa
porno film http://chinastudenttours.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/o-minora-e-dezvirginata-de-doua-colegi-mai-mari-si-linsa-in-pizda
porno selena gomez http://jeffersonbraswell.com/__media__/js/netsoltrademark.php?d=adult66.net/cuplu-de-japonezi-fac-sex-in-pat-pana-au-orgasm

Au fost disponibile mai putin de 500 mg os, asa ca am aplicat un tratament AG (gelatina) pentru a maximiza randamentul de colagen. Am obtinut o data de 29.500 ± 400 BP, pe care o consideram a fi o varsta minima, deoarece aceasta pretratare s-a aratat anterior subestimand varsta oaselor antice precum aceasta (Tabelul 3). Pentru a testa posibila perturbare la nivelul G1, am datat de asemenea patru probe faunale identificate ca provenind de la nivelurile G1 si G1 – G3, folosind ultrafiltrare (AF). Aceste probe au produs date care au fost mai mari sau mai apropiate de limita radiocarbonului (tabelul 3). Aceste probe au fost mai putin probabil sa fi fost tratate cu materiale de conservare decat oasele umane si, prin urmare, nu au fost preparate folosind metoda HPLC. Trei dintre aceste oase faunale sunt de la nivelul G1 (tabelul 1). Vedem mai multe variatii care ar fi de asteptat statistic daca combinam cele trei oase neandertale si trei oase faunale de la nivelul G1 pentru un test χ2 (media ponderata de eroare, 0,0027 ± 0,0004;t = 22,52; χ2 = 11,07). Acest lucru arata ca exista un nivel de varsta variabila a radiocarbonului la nivelul G1 si sugereaza posibilitatea amestecarii si miscarii materialului postdepozitional. In consecinta, instrumentele osoase nu pot fi asociate cu ramasitele de neanderthal decat daca se va face o alta intalnire directa cu radiocarbon folosind abordarea HYP. In mod clar, continutul scazut de colagen al punctelor pare sa impiedice acest lucru in acest moment.

Tabelul 3.

Determinarile radiocarbonului si datele analitice ale resturilor faunale si punctului osos Vindija

concluzii

Datarea AMS cu un singur aminoacid a neanderthalilor Vindija a dat rezultate care sunt substantial mai vechi decat varstele anterioare care au fost obtinute initial. Am aratat ca neanderthalii predau ∼44.000 cal BP Rezultatele sugereaza ca acest grup nu a fost o populatie neandertala refugiala cu supravietuire tarzie, asa cum se credea anterior si inseamna ca grupul nu s-a suprapus aproape sigur cu oamenii moderni anatomic din aceasta parte a Europei. In ciuda celor mai bune incercari ale noastre, nu am reusit sa intalnim industria osoasa asociata cu arheologia nivelului G1. O singura data pe care am obtinut-o dintr-o unitate stratigrafica ulterioara a fost mai tanara de 30.000 BP, dar din cauza faptului ca osul nu a fost tratat cu cele mai riguroase metode de tratare a tratamentului, ar putea fi mai vechi. Datarea cu alte materiale faunistice de la nivelul G1 a evidentiat o gama semnificativa de varsta, ceea ce ar putea indica o perturbare a secventei generale. Ramane deschisa intrebarea daca unele dintre puncte ar fi putut fi produse de neandertali. cu toate acestea, este parimonios sa concluzionam ca punctul pe scindare trebuie sa aiba cel putin o varsta maxima de 32.000-34.000 BP pe baza dovezilor pentru asocierea sa cu Aurignacianul in alte regiuni si, prin urmare, probabil ca va amana semnificativ Neanderthalii Vindija. Punctele osoase au fost recuperate pe intreg teritoriul Eurasiei cu date de pana la ∼37.000 BP (de exemplu, din situl Aurignacian din Pes’ko si din situl Chatelperronian din Arcy-sur-Cure) (6, 25, 26). Prin urmare, este clar ca atat oamenii moderni anatomic, cat si neanderthalii au produs puncte osoase,

Perceptia noastra asupra tranzitiei biologice dintre neandertali si oamenii moderni s-a schimbat radical in ultimul deceniu. Dovezile sugereaza intrepatrunderea si o suprapunere temporala semnificativa intre cei doi de la ∼44.000-40.000 cal BP Pe baza datelor noastre de hidroxiprolina si a rezultatelor ADN, neandertalii Vindija dateaza inainte de perioada in care primii oameni moderni au ajuns in Europa si s-au inrudit cu neandertalii.

metode

Screeningul osos de ZooMS.

Am utilizat amprentarea in masa a peptidelor de colagen sau ZooMS pentru a analiza colagenul de tip 1 (COL1) conservat din fragmente osoase neidentificate mici de pe site-ul Vindija. COL1 se caracterizeaza prin trei lanturi polipeptidice (alfa), iar in aceste lanturi exista mici diferente in secventele de aminoacizi intre diferite specii. Acestea ofera posibilitatea identificarii markerilor de aminoacizi specifici speciilor. Am utilizat spectrometrie de masa cu desorbtie / ionizare cu laser asistata de matrice pentru a determina masa relativa de incarcare ( m / z) valorile peptidelor digestive triptice din fiecare proba osoasa. Comparand aceste valori cu o biblioteca de fauna cunoscuta, am identificat oasele la genuri sau specii intr-un anumit caz (27 – 31). Am analizat un numar de 383 de probe osoase neidentificate din Pestera Vindija (nivelurile G1, G3 si unitatea stratigrafica G1 – G3).

Radiocarbon Dating.

Am utilizat doua metode diferite pentru a pregati esantioanele pentru intalnirea AMS. Mai intai, probele din artefacte au fost pretratate dupa procedura ORAU de rutina, cuprinzand o decalcifiere, spalare de baza, reacidificare, gelatinizare si ultrafiltrare (AF codificat in ORAU), asa cum este descris de Brock si colab. (20). Proba P41417 produce prea putin colagen pentru ultrafiltrare, astfel ca tratamentul a fost oprit dupa gelatinizare (AG codat). Cele patru probe osoase umane au fost datate folosind metoda de datare a radiocarbonului cu un singur aminoacid dezvoltata la ORAU (32). Aceasta metoda implica separarea aminoacizilor subivatizati de probe de colagen osos hidrolizate utilizand HPLC preparativa. Detaliile metodei sunt descrise in Anexa SI. Hidroxiprolina (HYP), a fost izolata prin Prep-HPLC, arsa, grafitizata si datata AMS. Aceasta abordare de pretratare este cea mai eficienta tehnica de eliminare a contaminantilor, inclusiv a materialelor de conservare (cu exceptia cazului in care s-a aplicat lipici pe baza de colagen).

Analiza ADN

Extractia ADN si pregatirea bibliotecii.

Analiza genomica a celor patru oase umane a fost realizata la Institutul Max Planck pentru Antropologie Evolutionara din Leipzig, Germania. Trei probe (Vi-207, Vi-208 si Vi- * 28) au fost pregatite special pentru acest proiect, in timp ce Vi-33.19 a fost anterior analizat ca parte a unui studiu separat (22). Oasele au fost prelevate folosind un exercitiu stomatologic steril si intre 15 si 30 mg pulbere osoasa a fost utilizata pentru extractia ADN-ului, cu exceptia Vi- * 28, in care au fost prelevate trei parti separate ale osului ( apendicele SI, Tabelul S3). Extractia ADN-ului a fost efectuata folosind o metoda pentru extragerea fragmentelor de ADN (33) cu modificari (34). Pulberea osoasa a Vi-207 si Vi-208 a fost tratata cu 0,5% solutie de hipoclorit inainte de extragerea ADN-ului (34) pentru a elimina contaminarea ADN-ului uman si microbian modern. Bibliotecile de secventiere de generatie urmatoare au fost preparate din 10 uL din fiecare extract, folosind doua scheme de pregatire a unei monocatenare: Vi-207 si Vi-208 cu o metoda publicata anterior (35), cu modificari de la Korlevic si colab. (34) si Vi- * 28 cu o schema de pregatire automata a bibliotecii (36). Bibliotecile au fost amplificate si etichetate cu o pereche de secvente unice de index (37, 38).

Imbogatirea ADN-ului mitocondrial si secventiere.

Bibliotecile amplificate au fost imbogatite pentru ADN-ul mitocondrial uman, folosind o captura de hibridizare bazata pe perle (39) cu modificari (40). Bibliotecile imbogatite au fost secventiate pe o platforma Illumina MiSeq cu o configuratie cu indice dublu (41). Citirile suprapuse din perechi au fost contopite (42) si mapate la genomul mitocondrial al secventei de referinta Cambridge Reference (rCRS; NC_0120920), folosind Burrows-Wheeler Aligner (43) cu parametrii „-n 0.01 -o 2-l 16500” (44) . Analizele au fost limitate la secvente cu combinatii perfecte de indici. Duplicatele PCR au fost eliminate prin utilizarea bam-rmdup (https://bitbucket.org/ustenzel/biohazard-tools), iar secventele mapate mai lungi de 35 de baze cu o calitate de mapare de cel putin 25 au fost pastrate pentru analizele ulterioare. Pentru a evalua daca rezultatele ar putea fi afectate de contaminarea umana moderna,

Analize filogenetice.

Pentru a reconstrui genomul mitocondrial al celor trei probe de hominina neanalizate anterior, secventele de ADN au fost realinizate la genomul mitocondrial Vindija 33,16 (AM948965) (45). Datele au fost procesate asa cum s-a descris anterior. Analiza datelor a fost realizata dupa cum a fost publicata anterior (ref. 28 pentru genomele mitocondriale complete, ref. 46 pentru datele mitocondriale partiale).

Recunoasteri

Multumim Fred H. Smith (Universitatea de Stat din Illinois), Jadranka Mauch Lenardic (Institutul pentru paleontologie si geologie cuaternara, Academia Croata de Stiinte si Arte), si lui Pavao Rudan (Academia Croata de Stiinte si Arte) pentru asistenta lor in esantionarea si analiza Osul neanderthal si faunal din Pestera Vindija. Ian Cartwright (Institutul de Arheologie, Universitatea din Oxford) a facut fotografiile osului Vi- * 28 de neanderthal. Rachel Hopkins a efectuat testele% N pe unele dintre oase. Multumim, de asemenea, personalului unitatii de accelerare a radiocarburilor de la Universitatea din Oxford si departamentului de genetica evolutiva de la Institutul Max Planck pentru Antropologie Evolutionara, Leipzig, pentru sprijinul acordat. Cercetarile care au dus la aceste rezultate au primit finantare de la Consiliul European de Cercetare (ERC) in cadrul celui de-al saptelea program-cadru al Uniunii Europene (PC7 / 2007-2013); Grant ERC 324139 „PalaeoChron” (la TH) si Grant ERC 694707 „100 genomi arhaici” (la SP). De asemenea, recunoastem sprijinul Royal Society pentru finantarea unei burse de cercetare universitara (catre MB).

Note de subsol

  • Contributii ale autorului: cercetare proiectata TD, SP si TH; TD, IK, DC, CK, PK, MH, SR, NP, MB, SP si TH au efectuat cercetari; TD, DC si TH au contribuit cu noi reactivi / instrumente analitice; Date analizate TD, IK, DC, CK, PK, MH, SR, NP, MB, SP si TH; TD si TH au scris lucrarea; si IK, DC, CK, PK, MH, SR, NP, MB si SP au contribuit la scrierea lucrarii.

  • Autorii declara niciun conflict de interese.

  • Acest articol este o trimitere directa PNAS.

  • Consultati Comentariul la pagina 10520.

  • Acest articol contine informatii de asistenta online la www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.1709235114/-/DCSupplemental.

Disponibil gratuit online prin optiunea de acces deschis PNAS.

Vezi rezumat

ARTICOLE SIMILAREDE LA ACELAȘI AUTOR